产品内容： 
提取液：液体 50 mL×1 瓶，4℃保存。 
试剂一：液体 8 mL×1 瓶，4℃避光保存。 
试剂二：液体 20 mL×1 瓶，4℃保存。 
试剂三：液体 5 mL×1 瓶，4℃保存。 
试剂四：液体 5 mL×1 瓶，4℃保存。 
 
产品说明： 
羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子，造成细胞结构和功能受损，进而导致体 内代谢紊乱引起疾病。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一，在抗氧化类保健品和 药品研究中得到广泛应用。 H2O2/ Fe2+ 通过 Fenton 反应产生羟自由基，将邻二氮菲- Fe2+水溶液中 Fe2+氧化为 Fe3+ ， 导致 536nm 吸光度下降，样品对 536nm 吸光度下降速率的抑制程度，反映了样品清除羟自由基的 能力。 
 
需自备的仪器和用品： 可见分光光度计、恒温水浴锅、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。 
 
操作步骤： 
一、 样品的制备： 
1. 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液）进行冰浴匀浆，然后 10000g，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 2. 血清、果汁等液体样品可直接测定。 
3. 提取物（或者药物）可配制成一定浓度，如 5 mg/mL。 
 
二、 操作步骤 
 
空白管
对照管
测定管
试剂一（μL）
150
150
150
试剂二（μL）
400
400
400
试剂三（μL）
100
100
100
立即混匀，防止局部颜色过浓
样品（μL）
 
 
250
试剂四（μL）
 
100
100
H2O（μL）
350
250
 
混匀、37℃，60min，双蒸水调零，测定 OD536
 
注意：空白管和标准管只需测定一次。
 
计算公式： 羟自由基清除率 D% =（A 测-A 对）÷（A 空-A 对）×100% A 空、A 对、A 测：空白管、对照管和测定管的吸光值。 
 
注意事项： 为了比较不同样品羟自由基清除能力，对于同一批样品必须加入等量的样品，血清、组织匀浆、 果汁等液体样品加入同样体积，提取物（或者药物）配制成同样浓度。